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古往今來(lái)，紅顏易老、英雄遲暮是悲傷的情感文學(xué)意象，傳說(shuō)彭祖“長(zhǎng)年八百，綿壽永世”，嫦娥偷拿不老仙丹，徐福遠(yuǎn)渡蓬萊只為尋求不老之藥。長(zhǎng)生不老、生命不滅始終是人類的美好夙愿。
隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，無(wú)數(shù)科研人員前赴后繼開(kāi)創(chuàng)著先進(jìn)醫(yī)療技術(shù)為捍衛(wèi)人類健康保駕護(hù)航。然而限于生命的復(fù)雜奧秘與技術(shù)發(fā)展的滯后，在病魔面前人類分秒必爭(zhēng)的努力常常是微不足道的。
近些年來(lái)，細(xì)胞基因治療橫空出世，為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展注入了新的活力和曙光，在生物醫(yī)藥領(lǐng)域尤其是癌癥及遺傳病治療領(lǐng)域極具發(fā)展前景！
一、細(xì)胞基因治療的前生今世
細(xì)胞基因治療（Cell and Gene Therapy，CGT）作為目前生物醫(yī)藥領(lǐng)域最如火如荼的研發(fā)方向之一，有望滿足部分危重疾病、罕見(jiàn)病、難治性疾病等迫切的臨床需求，具有巨大的發(fā)展?jié)摿褪袌?chǎng)前景，自問(wèn)世以來(lái)吸引萬(wàn)千矚目。
該療法主要由體外治療與體內(nèi)治療組成，細(xì)胞治療與基因治療分別是其代表，兩者相輔相成，各有千秋。目前，細(xì)胞基因治療的觸角正在伸向腫瘤、非腫瘤罕見(jiàn)病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、感官類疾病、代謝類疾病及其他難治性疾病，為攻克疑難雜癥，守護(hù)人類健康貢獻(xiàn)力量。
細(xì)胞治療是指應(yīng)用人自體或異體來(lái)源的細(xì)胞經(jīng)體外操作后輸入（或植入）人體，隨著細(xì)胞的分裂，基因會(huì)傳遞給后代細(xì)胞，最后再將細(xì)胞輸回體內(nèi)，進(jìn)而達(dá)到疾病治療的目的。
基因治療最初的提出是針對(duì)單基因缺陷的遺傳疾病，目的在于用一個(gè)正常的基因來(lái)代替缺陷基因或者來(lái)補(bǔ)救缺陷基因的致病因素，即通過(guò)基因添加、基因修正、基因沉默等方式修飾個(gè)體基因的表達(dá)或修復(fù)異?；?，達(dá)到治愈疾病目的的療法。
圖1：來(lái)源于網(wǎng)絡(luò)
自2012年起，基因治療開(kāi)始進(jìn)入臨床實(shí)踐，伴隨著時(shí)光流逝與科研人的辛勤努力，2017年全球基因治療進(jìn)入高速發(fā)展期。
圖2：作者自制
二、疑難雜癥病人的福音
科學(xué)的車(chē)輪緩緩向前，推動(dòng)著各種新型生物醫(yī)學(xué)技術(shù)問(wèn)世。一百多年前，Alexander Maximov 提出，在外周血淋巴細(xì)胞中有一個(gè)共存的循環(huán)干細(xì)胞群 ( gemeinsama stammzellen) ，這些細(xì)胞具有或能夠獲得多潛能性，這一理論成為目前體細(xì)胞治療研究的基礎(chǔ)，給罹患疑難雜癥的病人帶來(lái)了生命的希望。
而談起由其衍生的細(xì)胞基因療法，便不能避開(kāi)典型代表---抗癌新星CAR-T療法。在活躍的細(xì)胞療法中，免疫細(xì)胞療法占所有細(xì)胞療法的68%，其中研究最深入、最廣闊的CAR-T療法呈一枝獨(dú)秀的態(tài)勢(shì)。
簡(jiǎn)而言之，CAR-T療法是通過(guò)基因?qū)敕椒ǎㄏ俨《?，慢病毒，非病毒載體方式等），將抗原特異性CAR（胞外靶抗原結(jié)合域、鉸鏈區(qū)、跨膜結(jié)合域和胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域組成）導(dǎo)入患者T細(xì)胞，發(fā)揮殺傷腫瘤功能。胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)結(jié)構(gòu)域直接影響CAR活化T細(xì)胞效果，根據(jù)結(jié)構(gòu)不同CAR分為了四代，可謂是一代比一代進(jìn)步。
1992年，Sadelain等人成功地建立了逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移到T淋巴細(xì)胞的方法，為CAR-T療法的產(chǎn)生埋下伏筆。2011年，美國(guó)賓夕法尼亞大學(xué)Carl June教授及其團(tuán)隊(duì)將特異性識(shí)別CD19的CAR-T細(xì)胞用于B細(xì)胞來(lái)源的慢性淋巴細(xì)胞白血病治療，開(kāi)展的臨床試驗(yàn)取得了良好療效，打開(kāi)了腫瘤免疫治療的新世界大門(mén)。
據(jù)官方統(tǒng)計(jì)，截至2022年，全球在研 CGT 管線中體外治療占 73%，其中 CAR-T 約占體外治療的 49%，CAR-T 療法的主要治療領(lǐng)域?yàn)槟[瘤（98%），足以見(jiàn)其未來(lái)可期！
圖3：來(lái)源Frontiers in Pharmacology
三、未來(lái)已來(lái)，將是醫(yī)學(xué)發(fā)展的風(fēng)向標(biāo)
2013年，Science 雜志將腫瘤免疫治療評(píng)為2013年科技突破進(jìn)展第一名。截至 2022 年，全球公布的細(xì)胞與基因治療臨床方案已超過(guò) 1050 個(gè)，其中進(jìn)入Ⅲ期臨床的方案共有 82個(gè)，國(guó)內(nèi)臨床方案已超過(guò) 315 個(gè)。
據(jù)國(guó)內(nèi)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，使用細(xì)胞基因療法對(duì)抗惡性腫瘤治療應(yīng)用占據(jù)絕對(duì)的第一，臨床項(xiàng)目占比高達(dá) 61%，其中，免疫細(xì)胞治療占72%，溶瘤病毒治療占 26%。第二位是血液系統(tǒng)疾病，占比接近7%，體外細(xì)胞基因治療與體內(nèi)基因治療各占一半，在體內(nèi)基因治療中，全部采用 AAV 基因治療。第三位則是眼科遺傳病，約占 6%。
以我國(guó)科研團(tuán)隊(duì)發(fā)表在國(guó)際頂級(jí)血液類期刊Blood的論文A phase 1 study of a novel fully human BCMA-targeting CAR (CT103A) in patients with relapsed/refractory multiple myeloma為例，其研究結(jié)果顯示使用新型CAR-T細(xì)胞療法治療復(fù)發(fā)/難治性多發(fā)性骨髓瘤（RRMM）患者，可以達(dá)到100%的有效控制！截止到實(shí)驗(yàn)結(jié)束，依舊有77.8%的患者可檢測(cè)到CAR-T細(xì)胞，CAR-T細(xì)胞在體內(nèi)的中位時(shí)間長(zhǎng)達(dá)307.5天。
圖4：來(lái)源Blood
細(xì)胞基因療法無(wú)疑為掙扎于生存和死亡線間的病人們打了一劑強(qiáng)心劑，原本談癌色變的人們終于多了一份生機(jī)，未來(lái)已來(lái)，這也勢(shì)必是醫(yī)學(xué)發(fā)展的風(fēng)向標(biāo)！
圖5：作者自制
眾所周知，在CAR-T細(xì)胞治療的過(guò)程中，每一步都得萬(wàn)分小心。在CAR-T載體構(gòu)建及包裝過(guò)程中，通過(guò)病毒載體如腺病毒、腺相關(guān)病毒AAV、慢病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒等將CAR基因?qū)隩細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)CAR在T細(xì)胞上的表達(dá)，是CAR-T生產(chǎn)的核心技術(shù)。一款性能優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的安全柜能夠?yàn)檠芯空叩纳踩ｑ{護(hù)航、為實(shí)驗(yàn)成功增磚添瓦。
AirSafe1300 A2 生物安全柜具有7寸觸屏人機(jī)交互界面，優(yōu)質(zhì)的Hepa過(guò)濾器高效“阻泄漏”，確?？諝鉂崈舳葹镮SO 4級(jí)（10級(jí)）, 充分保護(hù)人員安全，預(yù)約滅菌縮短準(zhǔn)備時(shí)間，隨時(shí)隨心做實(shí)驗(yàn)。
生產(chǎn)病毒載體的上游工作包括細(xì)胞培養(yǎng)（分為懸浮/貼壁培養(yǎng)等）和病毒包裝，懸浮和貼壁細(xì)胞體系有助于獲得極高的病毒產(chǎn)量，因此活力強(qiáng)、狀態(tài)好、易轉(zhuǎn)染的細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)于生產(chǎn)病毒載體至關(guān)重要。一款性能優(yōu)良的細(xì)胞培養(yǎng)箱能讓貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞生命力更加旺盛。
HEROCELL系列二氧化碳培養(yǎng)箱依托一線科研人員的生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)和設(shè)計(jì)突破，其使用標(biāo)準(zhǔn)已達(dá)到醫(yī)用級(jí)別，為細(xì)胞生長(zhǎng)提供適宜環(huán)境和有效的污染控制技術(shù)，對(duì)于各種細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用手到擒來(lái)。
293細(xì)胞的懸浮擴(kuò)增是重要步驟，對(duì)于“四質(zhì)粒”慢病毒包裝系統(tǒng)的構(gòu)建至關(guān)重要，對(duì)待它們要如同嬰兒般溫柔，否則一切努力前功盡棄。一款優(yōu)質(zhì)的二氧化碳震蕩培養(yǎng)箱要擁有精確的溫度控制、CO2濃度控制，當(dāng)然了操作簡(jiǎn)潔方便也是相當(dāng)重要的。
Herocell X1二氧化碳振蕩培養(yǎng)箱由上海潤(rùn)度生物結(jié)合眾多生物培養(yǎng)客戶的一線經(jīng)驗(yàn)，推出的全新一代細(xì)胞震蕩培養(yǎng)箱，適合各類脆弱的細(xì)胞培養(yǎng)，讓細(xì)胞生命力更旺盛、活得更健康，充分地為大家的實(shí)驗(yàn)進(jìn)展保駕護(hù)航。
這款二氧化碳震蕩培養(yǎng)箱擁有獨(dú)特創(chuàng)新的軸承技術(shù)，有效減少背景熱量和污染風(fēng)險(xiǎn)，為細(xì)胞創(chuàng)造舒適的生長(zhǎng)環(huán)境，同時(shí)振幅可調(diào)，根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)，獨(dú)家定制震蕩模式性價(jià)比高。
眾所周知，通過(guò)基因修飾獲得穩(wěn)定的CAR-T細(xì)胞后，大規(guī)模的體外擴(kuò)增才能達(dá)到人們治療的所需劑量，這也是CAR-T療法面臨的關(guān)鍵挑戰(zhàn)。談到CAR-T細(xì)胞擴(kuò)增時(shí)，Wave生物反應(yīng)器當(dāng)仁不讓，其是主流擴(kuò)增方法之一。同樣，利用特殊的搖瓶來(lái)提高細(xì)胞培養(yǎng)的生物量濃度。
上海潤(rùn)度生物公司的搖瓶兼具專業(yè)性與實(shí)用性，與震蕩培養(yǎng)箱通力合作，相輔相成，助力CAR-T細(xì)胞生長(zhǎng)得更好更快。
四、細(xì)胞基因治療背后的倫理?yè)?dān)憂
然而，如火如荼的細(xì)胞基因治療背后的倫理問(wèn)題，需要人們深思與關(guān)注。在首次人體（first-in-human, FIH）臨床研究方面，因可借鑒經(jīng)驗(yàn)過(guò)少，如何平衡科學(xué)研究與倫理道德間的審查，仍是目前制約細(xì)胞和基因治療臨床試驗(yàn)開(kāi)展的因素之一。
面對(duì)復(fù)雜龐多的治療方式，國(guó)內(nèi)外的科研人員必須正視細(xì)胞和基因治療的風(fēng)險(xiǎn)獲益評(píng)估體系不成熟的風(fēng)險(xiǎn)與知情同意不充分的風(fēng)險(xiǎn)。此外，細(xì)胞免疫治療帶來(lái)的副作用亦是不容小覷，做好毒性管理是相關(guān)治療成功的關(guān)鍵步驟，是提高病人生存率和生存質(zhì)量的重要舉措。
圖5：來(lái)源參考文獻(xiàn)
然而，對(duì)于細(xì)胞基因療法而言，這些擔(dān)憂瑕不掩瑜，是為了讓新技術(shù)走得更遠(yuǎn)、更穩(wěn)。相信未來(lái)細(xì)胞基因療法在醫(yī)療研究領(lǐng)域大有可為，勢(shì)必在人類抵御疾病、追求長(zhǎng)生不老的征程中留下濃墨重彩的一筆，讓我們拭目以待！
參考文獻(xiàn)
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2. Wang D, Wang J, Hu G, et al. A phase 1 study of a novel fully human BCMA-targeting CAR (CT103A) in patients with relapsed/refractory multiple myeloma. Blood. 2021;137(21):2890-2901. doi:10.1182/blood.2020008936
3.賈國(guó)舒,曹萌,毛開(kāi)云等.細(xì)胞和基因治療首次人體臨床研究倫理審查要點(diǎn)探討[J].上海醫(yī)藥,2023,44(13):77-81.
